一、實(shí)驗(yàn)說明：

　　抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式，主要用于測定殺菌防霉劑對(duì)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。

　　

　　二、用具和材料：

　　霉菌培養(yǎng)皿，無菌吸管（或針筒），圓片濾紙（直徑50px），帶玻璃珠的無菌水，帶過濾漏斗的三角牌，鑷子，接種針（環(huán)），熔化狀態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基（最好保溫于45℃左右水浴中），一定濃度的藥劑，供試驗(yàn)用的菌種。

　　

　　三、試驗(yàn)過程：

　　1.用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中，用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散，過濾后制成混合孢子懸液。

　　2.用無菌吸管（或針筒）向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。

　　3.向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基（約45℃），將菌液與培養(yǎng)基混合均勻，待其冷卻。

　　4.用鑷子將圓片濾紙?jiān)诓煌瑵舛鹊姆烂箘┲薪n片刻，取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央，蓋上蓋子

　　5.置適宜溫度下，培養(yǎng)2~3d，觀察濾紙片圓片周圍的有無及大小。

　　

　　四、注意事項(xiàng)：

　　1.所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理，操作必須在無菌室（或無菌箱）內(nèi)于火焰旁進(jìn)行。

　　2.霉菌、細(xì)菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液，即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液，并非霉菌、細(xì)菌和酵母菌的混合液。

　　3.混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL.

　　4.倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高（一般為45℃左右），否則會(huì)引起微生物死亡。也不能太低，因?yàn)榄傊瑫?huì)很快凝結(jié)，以致攪拌不均勻，影響試驗(yàn)結(jié)果。

　　5.各種微生物的最適生長溫度不同（例如霉菌一般為25~30℃，細(xì)菌一般為32~37℃等），恒溫培養(yǎng)時(shí)宜分開放置。